Salicinoids是盐科植物特有的酚类糖苷(PGs),是已知的抗昆虫食草的防御剂。常见的例子是水杨素,salicortin试管婴儿的前期准备,tremuloidin和tremulacin,它们在柳树和杨树的叶子和树皮中积累到高浓度。尽管它们的生物合成途径尚不清楚,但最近的研究表明苯甲酸苄酯可能是潜在的生物合成中间体。鉴定了编码BAHD型酰基转移酶的两个候选基因,命名为PtACT47和PtACT49,并预测它们会产生这种苄基化的次级代谢产物。本文描述了这两种BAHD酰基转移酶的cDNA克隆,异源表达和体外功能表征。重组PtACT47表现出较低的底物选择性,可以利用乙酰辅酶a几月份做试管成功率高,苯甲酰辅酶a和肉桂酰辅酶a作为酰基供体,多种醇作为酰基受体。该酶与苯甲酰辅酶A和水杨醇显示出最大的Km/Kcat比(45.8 nM(-1)s(-1))和最低的Km值(45.1μM),并被命名为苯甲酰辅酶A:水杨醇O-苯甲酰基转移酶(PtSABT)。重组PtACT49利用较窄范围的底物,包括苯甲酰-CoA和乙酰-CoA以及有限数量的醇。对于苯甲酰-CoA和苯甲醇,观察到其最高Km/Kcat(31.8nM(-1)s(-1))和最低Km(55.3μM),并将其命名为苯甲酰-CoA:苯甲醇邻苯甲酰基转移酶(PtBEBT)。两种酶还能够以痕量水平合成植物挥发性醇酯,例如苯甲酸己酯。尽管所证明的活性与类盐生物合成中的试管婴儿的前期准备作用一致,但仍必须使用转基因杨树对该假设进行直接测试。
关键词:苯甲酰基转移酶;大肠杆菌异源表达;食草动物防御;杨树;毛果杨;红景天科;盐皮质酚糖苷。
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